ELISA試劑盒實驗操作中可能影響結(jié)果的原因及解決辦法

ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。上海恒遠將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下。
ELISA試劑盒實驗操作中可能影響結(jié)果的原因及解決辦法分析：
1 選擇試劑
選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)；
3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
ELISA試劑盒解決辦法：
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3、孵育可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。

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